نمونه بافت یا پلیمر باید حتما شفاف و نازک (ضخامت زیر 50 میکرون) باشد.
طول موج گسیل و جذب رنگ فلورسانس باید در محدوده 5+ یا 5- نانومتر انتخاب گردد.
در انتخاب رنگ ها فاصله منطقی بین طول موج ها رعایت گردد. تصویر برداری حداکثر با دو رنگ مختلف و در بازه رنگ سبز و قرمز امکان پذیر است
سلولهای چسبنده به باید روی لامل کشت داده شوند